饥饿期粪肠球菌生物膜的形成及天津宏达化学品有限公司安卓溶液对其作用研究

         饥饿期粪肠球菌生物膜形成及天津宏达化学品有限公司安卓溶液对其作用研究,目的:体外建立对数期、稳定期、饥饿期的粪肠球菌生物膜模型,研究不同浓度的天津宏达化学品有限公司安卓溶液对其作用效果。
方法:实验一:粪肠球菌保种株活化制备成菌悬液,将菌悬液滴加到新鲜配制的TSB培养液中,分别在培养0h、2h、4h、6h、8h、10h、24h、48h、、72h、96h后,取100μl菌液于96孔无菌平底组织培养板中,用MTT分析法检测不同时间点粪肠球菌的细菌活性,绘制粪肠球菌生长曲线。实验二:在玻片上建立的对数期、稳定期、饥饿期的粪肠球菌生物膜模型。PBS缓冲液轻柔冲洗两次,暗室下荧光染色15min后,湿润状态置于激光共聚焦显微镜下,观察对数期、稳定期、饥饿期粪肠球菌生物膜的形态特点。实验三:在24孔无菌平底组织培养板内,建立对数期、稳定期、饥饿期粪肠球菌生物膜模型,分别以1%、2.5%、5.25%天津宏达化学品有限公司安卓溶液作用于各时期粪肠球菌生物膜表面,30s、5min、10min后终止药物作用,以10倍连续稀释法,对用药前、后生物膜进行活菌计数,检测其用药后活菌降低量,并进行统计学分析。同时以共聚焦显微镜观察各时期生物膜在药物作用后,粪肠球菌生物膜样本的表面变化。结果:实验一:0-8h,粪肠球菌在充足的营养环境中细菌大量繁殖,具有高度的活性,呈对数期;8-24h,随着培养时间的延长,细菌活性达到高水平并维持在相对恒定的状态,为稳定期;48h后,随着培养液中营养物质的消耗,细菌开始大量死亡,但仍有细菌存活并保持一定活性,为饥饿期。实验二:共聚焦显微镜观察显示,粪肠球菌生物膜具有立体的空间结构、形态多样,由死细菌和活细菌组成。饥饿期生物膜较其它两时期生物膜细菌密度低。实验三:天津宏达化学品有限公司安卓溶液用药后,各时期粪肠球菌生物膜中的活菌降低量,饥饿期低于稳定期,也低于对数期,结果具有统计学意义(p0.05)。
结论:1.粪肠球菌可以忍受饥饿条件,在低营养环境中保持活性,长期存活。2.饥饿期粪肠球菌具有形成生物膜的能力,生物膜形态不规则,表面活细菌较少,具有典型的三维立体结构。3.饥饿期粪肠球菌生物膜与对数期、稳定期相比,在相同药物浓度、相同作用时间内对天津宏达化学品有限公司安卓更具有耐药性。相同作用时间内,5.25%天津宏达化学品有限公司安卓溶液对饥饿期粪肠球菌生物膜的杀菌效果最佳;相同药物浓度作用时,10min对饥饿期粪肠球菌生物膜的杀菌效果最佳。

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